Kalibrera pipetter

En pipett är en typ av laboratorieutrustning som används för att mäta och överföra mycket små mängder vätska. Noggrannhet och precision vid pipettmätning är nödvändig eftersom alla avvikelser i de dispenserade volymerna kan påverka resultaten av ett experiment. För att säkerställa noggrannheten är det nödvändigt att kontrollera pipettkalibreringen med några månaders mellanrum. Kalibreringsprocessen hjälper till att verifiera att utrustningen dispenserar rätt volymer så att den kan korrigeras om den inte är.

Steg

Del 1 av 2: Kontrollera kalibreringen

Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 1
1. Samla det nödvändiga materialet. För att kontrollera kalibreringen av en pipett behöver du en pipett, pipettspetsar, destillerat vatten, en bägare, termometer, en våg och diskar. Balansen måste vara specifik för mikrogram för att kalibrera mikropipetter med maximalt 1 µl.
  • Du behöver inte mer än 5 ml vatten. Fyll koppen med vatten.
  • Se till att pipettspetsarna passar ordentligt.
Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 2
2. Mät temperaturen på det destillerade vattnet. Placera termometern i vattnet och låt den stå i minst en minut. Om den röda linjen på termometern fortfarande rör sig, låt den stå i ytterligare en minut. Efter en minut, registrera temperaturen i en anteckningsbok. Ta bort termometern och torka den när du är klar.
  • Vattnets temperatur är viktig för de beräkningar som görs för att verifiera kalibreringen.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 3
    3. Placera vågen på vågen och nollställ den. Helst använder du en balans med dörrar och ett isolerat rum. Ställ skålen i rummet och stäng dörrarna. Om det inte finns några dörrar, ställ bara skålen på vågen. Tryck på "Noll" eller "Tara"-knappen och vänta tills vågen visar noll.
  • Genom att nollställa balansen ingår inte vikten på plastskålen och det blir möjligt att endast mäta vikten av det du stoppar i skålen.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 4
    4. Förbered pipetten för kalibrering. Torka av pipetten med etanol för att döda alla föroreningar innan du börjar - se också till att pipettens spets inte blir igensatt. Placera rätt spets på änden och ställ in volymen du vill testa.
  • För kalibrering, testa både den minsta volymen och den största volymen pipetten kan leverera.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 5
    5. Spola spetsen innan kalibrering. Tryck in knappen till det första stoppet och för in spetsen i det destillerade vattnet så att cirka 2 mm av den är nedsänkt i vätskan. Släpp knappen för att suga upp lite vätska och häll sedan ut vätskan igen genom att trycka ner knappen. Upprepa tre gånger för att spola spetsen.
  • Tryck på knappen till det andra stoppet för att dispensera eventuell vätska kvar i spetsen, ta sedan bort pipetten från vattnet.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 6
    6. Aspirera kalibreringsvolymen. Med spetsen ur vätskan, tryck ner knappen till första stoppet. Placera cirka 2 mm från spetsen i det destillerade vattnet och släpp knappen för att dra in vätskan i spetsen. Vänta ungefär en sekund innan du tar bort spetsen från vattnet.
  • Se till att spetsen är helt nedsänkt under hela aspirationsprocessen. Du vill inte ha bubblor i spetsen, annars blir resultatet inte rätt.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 7
    7. Dosera vätskan i vågen på vågen. Placera spetsen mot botten av skålen och tryck ner vredet till första stoppet. Flytta till en annan plats, något bort från vattnet, och tryck på knappen till det andra stoppet. Håll ned knappen och lyft upp vågens spets.
  • Behåll spetsen på pipetten, eftersom du kommer att använda den igen för att göra fler kalibreringstester. Se till att spetsen inte rör vid någonting.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 8
    8. Anteckna vikten som anger balansen. Stäng dörren när du använder en våg i ett isolerat rum. Vänta tills värdena slutar ändras. Skriv detta värde i din anteckningsbok.
  • Det är viktigt att vänta tills siffran stabiliseras innan du skriver ner det. Dina avläsningar blir fel om du inte väntar.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 9
    9. Upprepa denna process tills du har gjort minst 10 mätningar. Nollställ balansen, spola spetsen, aspirera samma volym, dispensera volymen och ta sedan vikten. Du behöver flera inspelningar med samma volym och sedan kan du snitta alla inspelningar tillsammans.
  • Du kan upprepa samma process med olika volymer, så länge du tar flera mätningar per volym.
  • Del 2 av 2: Beräkna resultaten

    Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 10
    1. Använd formeln för den beräknade volymen. Formeln för att beräkna volymen som dispenseras av pipetten är V = w *Z, där w är vikten av vattnet, Z är omvandlingsfaktorn baserad på vattnets densitet och V är den beräknade volymen av hur mycket vatten som har dispenserats.
    • Du kan hitta Z-variabeln genom att slå upp vattnets densitet med den temperatur som registrerades i början av experimentet.
    • Till exempel: Om temperaturen på vattnet var 23°C, antar du ett Z-värde på 1,0035 µg/mg.
    Bild med titeln Do Pipette Calibration Step 11
    2. Beräkna medelvärdet av de upprepade försöken. Du måste ha vägt volymen vatten som doserats av pipetten minst 10 gånger. För att beräkna medelvärdet av alla dessa värden, addera dem tillsammans och dividera med 10. Om du har gjort fler eller färre försök, lägg till varje försök och dividera summan med det totala antalet försök.
  • Till exempel: De tio vikterna du registrerade för en pipettvolym på 10 µl är följande: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 och 9,98.
  • Medelvärdet är: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9 984
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 12
    3. Tillämpa variablerna på ekvationen och lös den. När du har bestämt de korrekta värdena för varje variabel kan du räkna in dem i ekvationen och lösa den beräknade volymen. För att lösa detta, multiplicera helt enkelt medelvikten för alla testvärden med Z-värdet.
  • Till exempel: V = w *Z = 9,984 *1,0035 = 10,019
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 13
    4. Beräkna pipettens noggrannhet. För att beräkna noggrannheten kan du använda ekvationen A = 100 x Vsnitt/V0 användning, där A är pipettens noggrannhet, Vsnitt den beräknade genomsnittliga volymen och V0 värdet du anger för pipetten. Noggrannheten bör vara mellan 99-101 %.
  • Om pipetten är korrekt kalibrerad bör det beräknade värdet vara mycket nära det faktiska värdet du ställt in på pipetten.
  • Till exempel: A = 100 x Vsnitt/V0 = 100 x 10,019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19 %
  • Denna pipett är korrekt kalibrerad.
  • Bild med titeln Gör pipettkalibrering steg 14
    5. Skicka in pipetten för kalibrering vid behov. Om din pipett inte klarar kalibreringstestet, sluta omedelbart använda den för experiment. Pipetter är mycket ömtåliga och dyra delar av laboratorieutrustning. Du kan inte reparera kalibreringen själv, så du måste skicka in den för korrekt underhåll. Alternativt kommer några företag till ditt labb och kalibrerar dina pipetter.
  • För service, vänligen kontakta företaget som tillverkar ditt specifika märke av pipett.

  • Оцените, пожалуйста статью