Skapa en kemisk utspädningsserie

Inom kemi är en utspädning processen att minska koncentrationen av ett ämne i en lösning. En seriell spädning eller spädningsserie är den upprepade spädningen av en lösning för att snabbt förstärka utspädningsfaktorn. Detta utförs ofta under experiment som kräver mycket utspädda lösningar med stor noggrannhet, såsom de med koncentrationskurvor på en logaritmisk skala eller de experiment för att bestämma bakterieantaltäthet. Serieutspädningar används i stor utsträckning inom experimentella vetenskaper, såsom biokemi, mikrobiologi, farmakologi och fysik.

Steg

Metod 1 av 2: Utför en standardutspädning

Bild med titeln Gör serieutspädningar steg 1
1. Bestäm vad rätt spädningsmedel är. Vätskan du kommer att använda för att späda ett ämne är mycket viktig. Många lösningar späds i destillerat vatten, men så är inte alltid fallet. Om du ska späda ut bakterier eller andra celler, kommer du förmodligen att späda i odlingsmedia. Vätskan du väljer kommer att användas för varje seriell spädning.
  • Om du inte är säker på vilket spädningsmedel du ska använda, be om hjälp eller slå upp det online för att se om andra personer har gjort en liknande spädning.
Bild med titeln Gör serieutspädningar steg 2
2. Förbered flera provrör med 9 ml spädningsmedel. Dessa rör fungerar som startvärden för din utspädning. Du ska lägga till det outspädda provet i det första röret och sedan späda i serie i följande rör.
  • Det är bra att märka alla rör innan du börjar för att inte bli förvirrad när du börjar arbeta med spädningarna.
  • Varje provrör innehåller en 10-faldig utspädning jämfört med den outspädda vätskan. Det första provröret blir en utspädning på 1:10, det andra på 1:100, det tredje på 1:1000 osv. Bestäm i förväg antalet spädningar du behöver så att du inte slösar provrör eller spädningsmedel.
  • Bild med titeln Gör serieutspädningar steg 3
    3. Förbered ett provrör med minst 2 ml av den outspädda lösningen. Den minsta mängd som krävs för denna serieutspädning är 1 ml av den outspädda lösningen. Om du bara har 1 ml får du ingen kvarvarande outspädd lösning. Märk detta rör som OO för snygg lösning.
  • Blanda lösningen noggrant före spädning.
  • Bild med titeln Gör serieutspädningar steg 4
    4. Utför den första spädningen. Ta 1 ml av den outspädda lösningen i provröret OO med en pipett och överför till det märkta provröret 1:10 med 9 ml av spädningsmedlet och blanda. Det finns nu 1 ml av den outspädda lösningen i 9 ml av spädningsmedlet. Sålunda späds lösningen med en faktor 10.
    Bild med titeln Gör seriella utspädningar steg 5
    5. Utför den andra spädningen. För den andra serieutspädningen, ta 1 ml av lösningen från provröret 1:10 och gör detta med 9 ml spädning i provröret 1:100. Blanda provrör 1:10 noggrant innan du lägger till i nästa provrör. En igen provröret 1:100 efter utspädning. Lösningen av provrör 1:10 späds nu 10 gånger i provrör 1:100.
    Bild med titeln Gör serieutspädningar steg 6
    6. Förläng denna procedur för serieutspädningar med fler serier. Denna process kan upprepas så många gånger som behövs för att erhålla den önskade lösningen. I ett experiment med koncentrationskurvor kan man göra en serieutspädning av en serie lösningar med spädningar på 1, 1:10, 1:100, 1:1000.

    Metod 2 av 2: Beräkna den slutliga utspädningsfaktorn och koncentrationen

    Bild med titeln Gör seriella utspädningar steg 7
    1. Beräkna förhållandet mellan den slutliga utspädningen i en serieutspädning. Det totala utspädningsförhållandet kan bestämmas genom att multiplicera utspädningsfaktorn för varje steg som leder fram till det sista steget. Detta kan illustreras matematiskt med ekvationen dt=D1 x D2 x D3 x … x Dn varigenom dt den totala utspädningsfaktorn är och dn utspädningsförhållandet.
    • Låt oss till exempel säga att du applicerade en utspädning av 1:10 på en vätska 4x. Tillämpa din utspädningsfaktor på ekvationen: Dt=10 x 10 x 10 x 10=10.000
    • Den slutliga utspädningsfaktorn i det fjärde provröret i din serieutspädning är 1:10.000. Koncentrationen av ämnet är nu 10.000 gånger mindre än den ursprungliga outspädda lösningen.
    Bild med titeln Gör serieutspädningar steg 8
    2. Bestäm koncentrationen av lösningen efter utspädning. För att bestämma den slutliga koncentrationen av lösningen efter serieutspädning måste du känna till den initiala koncentrationen. Ekvationen är Cslutvärde=Cursprungligt värde/D varigenom Cslutvärde är den slutliga koncentrationen av den utspädda lösningen, Cursprungligt värde den ursprungliga koncentrationen av den ursprungliga lösningen och d utspädningsförhållandet som tidigare bestämts.
  • Till exempel: Om du började med en lösning av celler med en koncentration av 1.000.000 celler per ml och ett utspädningsförhållande på 1.000, vad är då slutkoncentrationen av det utspädda provet?
  • Med hjälp av ekvationen:
  • Cslutvärde=Cursprungligt värde/D
  • Cslutvärde=1.000.000/1.000
  • Cslutvärde=1.000 celler per ml.
  • Bild med titeln Gör serieutspädningar steg 9
    3. Kontrollera om alla enheter matchar. När du gör en beräkning måste du se till att enheterna i slutresultatet alltid är korrekta. Om du började med `celler per ml`, se till att du också slutar med `celler per ml`. Om din startkoncentration är i "parts per million (ppm)", bör din slutliga koncentration också vara "ppm".

    Оцените, пожалуйста статью